為了研究LncRNA-HMG如何調(diào)節(jié)p53的穩(wěn)定性。RIP實驗證實p53與LncRNA-HMG互作（圖2a）。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（UPS）對于調(diào)節(jié)p53的穩(wěn)定性至關(guān)重要。因此，利用蛋白酶體抑制劑MG132分析LncRNA-HMG調(diào)控p53穩(wěn)定是否依賴于UPS。發(fā)現(xiàn)MG132處理能逆轉(zhuǎn)LncRNA-HMG缺失誘導(dǎo)的p53升高（圖2b），表明LncRNA-HMG以蛋白酶體依賴的方式調(diào)節(jié)p53蛋白水平。此外，Co-IP分析顯示在LncRNA-HMG缺失的細(xì)胞中，p53的泛素化水平降低（圖2c），而LncRNA-HMG過表達(dá)可促進(jìn)p53的泛素化（圖2d）。表明LncRNA-HMG促進(jìn)p53泛素化，導(dǎo)致p53降解。

另外，LncRNA-HMG對MDM2水平?jīng)]有影響（圖2h）。LncRNA-HMG的缺失減少p53和MDM2之間的相互作用（圖2i），LncRNA-HMG過表達(dá)則增加MDM2介導(dǎo)的p53泛素化（圖2j）。此外，MDM2拮抗劑Nutlin-3消除了LncRNA-HMG對p53蛋白水平的影響（圖2k）。表明LncRNA-HMG促進(jìn)MDM2與p53的相互作用，增強p53的泛素化。

后續(xù)的功能回復(fù)實驗顯示，LncRNA-HMG依賴于p53調(diào)節(jié)ROS狀態(tài)（圖2l-m）。

圖2 LncRNA-HMG協(xié)助MDM2增加p53的泛素化（Ref. Fig 5/S4）